近年藥物雜質(zhì)研究都有哪些新進(jìn)展

1. 對于原料藥，需依據(jù)所采用的具體合成工藝來分析在研產(chǎn)品中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)；

2. 基于產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)特征來分析可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物；

3. 對于制劑，可以通過主藥與輔料/包材的相容性研究來分析產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。

4. 通過強(qiáng)制降解試驗來分析產(chǎn)品中潛在的降解產(chǎn)物。可考察樣品在一定的酸、堿、高溫、光照、氧化等因素影響下的降解產(chǎn)物。對于固體原料藥，需分別考察在固體和溶液狀態(tài)下的降解產(chǎn)物。必要時，可以根據(jù)情況進(jìn)行以上因素綜合存在時的強(qiáng)制降解試驗。

5. 考察樣品在確定的實際貯藏條件下所產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。根據(jù)在研產(chǎn)品的性質(zhì)，確定適宜的貯藏條件在穩(wěn)定性研究中，考察產(chǎn)品在一定溫度濕度、光線等實際保存、運輸、使用過程中隨時間產(chǎn)生的降解產(chǎn)物

歐洲藥品管理局(EMA)建議“應(yīng)基于扎實的科學(xué)評價，全面考慮參與合成的化學(xué)反應(yīng)、原輔料中可能帶人新原料藥的雜質(zhì)和可能的降解產(chǎn)物，確定最有可能在新藥的合成、純化和貯存期間出現(xiàn)的實際和潛在雜質(zhì)”。

2015 年版《化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》明確了不同保存溫度下的擬加速和長期穩(wěn)定性試驗方法，并在有效期的基礎(chǔ)上提出了復(fù)檢期。參照《中國藥典》和《化學(xué)藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。

亮菌甲素注射劑中主要雜質(zhì)LC-MS 分析

2.1一般雜質(zhì)的檢測

氣相色譜法(GC)適用于易揮發(fā)且熱穩(wěn)定性的物質(zhì)，一般用于殘留溶劑的檢測。無機(jī)雜質(zhì)可能來源于原料藥、輔料或制劑的生產(chǎn)過程和環(huán)境污染物中。2015年版《中國藥典》加強(qiáng)了包括催化劑在內(nèi)的無機(jī)雜質(zhì)檢測方法的研究與修訂，提高了方法的準(zhǔn)確性。

近年來，色譜法在各國藥典中得到了廣泛應(yīng)用!其中有關(guān)物質(zhì)分析方法的主流還屬高效液相色譜技術(shù)。HPLC 測定有關(guān)物質(zhì)的定量方法主要有雜質(zhì)對照品法(外標(biāo)法)、加校正因子和不加校正因子的主成分自身對照法，以及面積歸一化法。

其他新型色譜分析方法如超高效液相色譜UPLC也具有其獨特的優(yōu)勢。UPLC在《美國藥典》中已得到應(yīng)用。2015年版《中國藥典》中雖未將其作為新液相色譜方法收載，但也積極推動了UPLC在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定中的應(yīng)用。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)因其卓越的靈敏度、高選擇性和快速的特點，避免了樣品復(fù)雜的前處理過程，已成為藥物中微量雜質(zhì)分析和結(jié)構(gòu)鑒定的首選。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)結(jié)合了氣相色譜高效與質(zhì)譜結(jié)構(gòu)鑒定的優(yōu)勢，適用于定性、定量分析熱穩(wěn)定、易揮發(fā)的多組分混合物中有機(jī)揮發(fā)性雜質(zhì)。

核磁共振(NMR)技術(shù)能夠?qū)ξ粗衔锾峁┯嘘P(guān)鍵合和立體化學(xué)的特定信息，并對未經(jīng)分離提取的復(fù)雜樣品提供定性定量信息。與LC聯(lián)用，更加強(qiáng)了NMR對有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)解析能力，應(yīng)用于藥品質(zhì)量評估。高效液相色譜-固相微萃取-核磁共振聯(lián)用儀(LC/SPE/NMR)是目前應(yīng)用最先進(jìn) LC-NMR 技術(shù)的儀器。

2.2手性雜質(zhì)的檢測

手性雜質(zhì)與藥物互為手性異構(gòu)體，兩者藥效和藥動學(xué)行為的差異會導(dǎo)致不同的藥理和毒理學(xué)作用，產(chǎn)生藥物不良反應(yīng)。因此手性雜質(zhì)的檢測也是質(zhì)量控制的重要內(nèi)容。對于手性雜質(zhì)的檢測廣泛采用手性色譜法和高效毛細(xì)管電泳法等。手性高效液相色譜法分為直接法和間接法，前者包括手性固定相法和手性流動相添加劑法，后者為手性試劑衍生化法。

超臨界流體色譜(SFC)技術(shù)作為氣相色譜和液相色譜的有力補(bǔ)充，兼有二者優(yōu)點，其在手性藥物雜質(zhì)分析和天然高分子化合物制備中有著重要應(yīng)用。

2.3遺傳毒性雜質(zhì)

遺傳毒性雜質(zhì)在極低水平便能與DNA相互作用，具有很高的致癌致突變風(fēng)險。GC-MS是揮發(fā)性遺傳毒性雜質(zhì)檢測不可或缺的工具。通常情況下，頂空氣相色譜和GC-MS是分析鹵化物磺酸鹽和環(huán)氧化物的首選技術(shù)。

在藥物質(zhì)量研究過程中，經(jīng)常會出現(xiàn)一些未知的雜質(zhì)，這種情況下往往需對未知雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。未知雜質(zhì)的鑒定包括了制備分離提純及結(jié)構(gòu)檢測兩部分，首先通過未知雜質(zhì)出峰時間定位進(jìn)行樣品收集，隨后進(jìn)行提純。達(dá)到一定純度后，即可通過液相、氣相、紅外、紫外、核磁等多方法檢測，確定該未知雜質(zhì)結(jié)構(gòu)。

以佳途科技未知雜質(zhì)制備分離及結(jié)構(gòu)鑒定業(yè)務(wù)為例，整體步驟是：雜質(zhì)生成條件的摸索和放大-雜質(zhì)初步分離-雜質(zhì)精制純化-雜質(zhì)結(jié)構(gòu)檢測-雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定或確證，其中雜質(zhì)初步分離階段將使用柱層析，隨后通過液相制備等到純度較高的樣品，最后利用MS、NMR、UV、IR、XRSD、CD、ORD.DSC.TGA等檢測方案確認(rèn)該雜質(zhì)結(jié)構(gòu)。

對于手性化合物，或者低含量（≤0.1%）、分離度差、易降解、溶解性差等雜質(zhì)，往往需要配備多種類型的專用制備柱，才能滿足對映異構(gòu)體、大極性、弱保留等化合物的制備分離需求。

佳途科技未知雜質(zhì)研究思路和方案

3.1一般雜質(zhì)限度制定方法。

在ICHQ3A、Q3B的指導(dǎo)原則中，將雜質(zhì)限度定義為：在特定水平下單個雜質(zhì)或給定雜質(zhì)譜的生物學(xué)安全性資料的獲得和評價過程。該指導(dǎo)原則通過制定雜質(zhì)的報告、鑒定和認(rèn)證閾值監(jiān)管雜質(zhì)。雜質(zhì)限度的確定首先要有充分的安全性依據(jù)，結(jié)合藥物工藝路線，綜合藥學(xué)藥理毒理及臨床研究結(jié)果判定。其次，在排除為遺傳毒性雜質(zhì)的情況下，可綜合考慮生產(chǎn)的可行性和產(chǎn)品的穩(wěn)定性制定合理的雜質(zhì)限度。雜質(zhì)限度應(yīng)考慮患者人群、每日劑量、給藥途徑、用藥持續(xù)時間等因素。

3.2 遺傳毒性雜質(zhì)限度制定方法

近年來，遺傳毒性雜質(zhì)限度控制的法規(guī)逐步健全。2006年EMA公布了遺傳毒性雜質(zhì)限度指南的最終版。2008年底美國FDA發(fā)布了遺傳毒性雜質(zhì)指南草案，以及由美國藥物研究和制造商協(xié)會(PhRMA)發(fā)布的PhRMA意見書。

ICH于2014年7月15日正式發(fā)布了《基因毒性雜質(zhì)指南M7》，為遺傳毒性雜質(zhì)的鑒別、分類、定量分析和控制提出了切實可行的依據(jù)和方法，彌補(bǔ)EMA及FDA關(guān)于遺傳毒性雜質(zhì)控制指南在某些方面存在的不確定性和分歧。

化學(xué)藥物雜質(zhì)研究是化藥質(zhì)量控制的重要方面，貫穿于整個藥物研究過程。相信隨著分析新技術(shù)的出現(xiàn)和應(yīng)用以及我國藥物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)更加嚴(yán)格規(guī)范化，藥物雜質(zhì)研究必將更加透徹，藥物使用將更加安全有效。